1、取血

① 血液標本的采集  a、毛細血管采血法  b、靜脈采血法  c、從人體采血常取自耳垂邊緣或無(wú)名指側面

② 常用血液標本抗凝劑及其使用選擇a、檸檬酸鈉（枸櫞酸鈉）；b、草酸鈉（乙二酸的鈉鹽）；c、雙草酸鹽抗凝劑 ；d、肝素（含硫酸基團的粘多糖）；e、乙二胺四乙酸（EDTA）鹽

③ 第一滴血棄去不用，再由玻片一端承接約3mm直徑的血滴，將此玻片保持水平。

2、涂片

① 玻片準備

a、 載玻片：取新載玻片或一般將用過(guò)的載玻片先用洗衣粉水溶液煮沸2分鐘，又由流水沖洗，再經(jīng)清潔液浸泡并翻動(dòng)，約過(guò)1小時(shí)或過(guò)夜，用流水反復沖洗，最后入95%酒精浸泡約1小時(shí)。取出，以潔凈布巾夾持玻片邊緣擦干備用，或者使用無(wú)菌免洗載玻片。

b、 蓋玻片：一般使用新蓋玻片。

c、 推玻片：另取一個(gè)邊緣平整的潔凈載玻片為推玻片或直接另取一個(gè)蓋玻片做推玻片。

② 推片：將推玻片保持與載玻片30度角，按1的方向稍往后移與血滴接觸，即可見(jiàn)血液沿推片下緣散開(kāi)，再以一定均勻的速度沿載玻片平面平穩的向2的方向滑動(dòng)，至血液鋪完血膜為止。

③ 血涂片質(zhì)量評價(jià)： 均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側（注意：血滴大，速度快、角度大 → 血膜厚）

3、染色

① 血膜要干透后才能染色，否則染色時(shí)易脫落。

② 用蠟筆在血膜兩頭劃線(xiàn)，平放于染色架上。

③ 染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細胞多少有關(guān)，一般染液淡、染色時(shí)間長(cháng)些效果好。

④ 染液不能過(guò)少，以防蒸發(fā)沉淀。

⑤ 沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應以流水沖，防染料沉著(zhù)。沖洗時(shí)間也不能長(cháng)。

⑥ 染色過(guò)淡，可復染。

⑦ 染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色。

4、鏡檢

① 打開(kāi)主電源，調整照明度。

② 將染色玻片放置在載物臺上。

③ 先用10×物鏡觀(guān)察，轉動(dòng)粗調手輪，見(jiàn)到血涂片影形。轉動(dòng)微調手輪即可得清晰的物像。

④ 將需要使用的物鏡放入光路，用粗調、微調旋鈕調整對血涂片的焦距。

⑤ 需用油鏡觀(guān)察時(shí)，在血涂片的觀(guān)察部位上加滴香柏油，用粗調、微調旋鈕調整好焦距。

⑥ 記錄觀(guān)察結果。

⑦ 用油鏡觀(guān)察的，實(shí)驗結束，須用擦鏡紙蘸少許二甲苯，擦拭鏡頭。

⑧ 關(guān)上電源開(kāi)關(guān)。