BCA測出結果是考馬的2倍

發(fā)布時(shí)間：2014/6/5 8:32:31　瀏覽次數：7243　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

樣品為單胞藻，是浮游植物,同樣的樣品采用不同蛋白定量方法進(jìn)行測定。結果表明，BCA方法獲得的蛋白含量是考馬斯亮藍法得到的兩倍，為什么會(huì )有兩倍差距，問(wèn)題出在哪里？哪個(gè)為準呢？

蛋白質(zhì)測定的方法有諸多種，目前針對組織樣本采用的比較普遍的方法時(shí)考馬斯亮藍蛋白定量和BCA蛋白定量居多，但是蛋白測定無(wú)論是哪一種方法都會(huì )有一定的局限性；考馬斯亮藍通過(guò)主要是與蛋白質(zhì)中的堿性氨基酸（特別是精氨酸）和芳香族氨基酸殘基相結合，進(jìn)行蛋白定量，非堿性氨基酸部分就會(huì )被忽略，如此測定結果有可能測定結果比真實(shí)結果偏低；而BCA蛋白定量試劑盒通過(guò)測被蛋白質(zhì)易氧化成分（巰基，酚基）還原的一價(jià)銅離子，而間接得出蛋白質(zhì)量。蛋白質(zhì)中可能含有其它雜質(zhì)，且是易氧化成分，則可能BCA測量結果大于真實(shí)值。再加之BCA方法靈敏度也偏高，所測結果有可能會(huì )比考馬斯亮藍方法測得結果偏高情況。另外就是您測出的OD值過(guò)于偏高，高出試劑盒檢測限，需要進(jìn)行稀釋后再測定效果會(huì )比較好。

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